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若实验中的色谱峰无法完全分离,应如何改善实验条件
柱温提高,更换新柱或更合适的柱子,选择更适合极性的流动相都有利于混合样品分离。
更换色谱柱:不同品牌的色谱柱具有不同的填料粒径和极性,可以尝试更换不同型号的色谱柱,以找到适合分离天麻素对羟基苯甲醇的色谱柱。选择具有合适填料粒径和极性的色谱柱,可以提高天麻素对羟基苯甲醇的分离度。
流动相不合适,更换流动相及重新摸配比。2 可以通过调整流速达到更好的分离结果,如原来的1 ml/min,调到0.7ml/min,可能会有意想不到的效果。
在色谱测试实验过程中,待测样品中***组分无法基线分离是因为色谱柱样本占满,可通过更换新的色谱柱改变测试环境从而改善色谱分离条件。
(1)选择合适的流动相,使其流经色谱柱时,受到的阻力减小,从而能迅速通过色谱柱,且必须对载液加高压。(2)可选择合适的固定相和流动相以达到最佳分离效果。
在气相中主要通过更换合适的色谱柱和调节程序升温来实现更好的分离。但是一般情况下程序升温对被分析物分离度的贡献有限,推荐更换相应的色谱柱来获得更好的分离。
高效液相色谱与气相色谱实验条件主要优化哪些因素?
1、另外可以用作流动相的化合物也特别多,选择余地大。(3) 关于样品的回收:与气相色谱相比,高效液相色谱的另一个优点是样品回收比较容易,只要开口容器放在柱子末端,就可以很容易地将所分离的各组分收集。
2、论述高效液相色谱法用于中药质量研究时:做高效液相色谱实验前要根据化合物的结构来确定液相分离模式,不是说反相液相对所有的都能进行分析。
3、仪器构造不同 气相色谱仪由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。进样部分、色谱柱和检测器的温度均在控制状态。
4、气相色谱法色谱条件的选择如下:色谱柱的选择:固定相按极性相似原则选择,沸点差别为主样品选非极性固定液,极性差别为主的样品选极性固定液。柱长的选择,增加柱长分离度增大。
5、高效液相色谱(HPLC)是目前常用的一种分离和分析技术,其分离效果和分离速度主要依赖于色谱柱。提高色谱柱的效率是HPLC分离的关键,以下是提高柱效的几种途径。
6、检测器的灵敏度更高,气相色谱FID的灵敏度可测到pg级的。
高效液相色谱中怎样改善条件达到分离度要求
1、选择合适的柱:选择合适的柱是提高分离度的重要因素。不同柱的化学组成和物理结构各不相同,其选择应该根据样品的性质、目标化合物的特征和分离条件来进行。
2、改变流动性比例,可同时调整流速,减少进样量。减少有机相比例,例如50%乙腈可改成40%、30%等,注:研发时可用。
3、色谱柱,色谱柱使用时间长了,柱效会降低,会影响到分离度的,改善方法是更换新的色谱柱。如果已经是新的色谱柱了,分离度还不好,那可以***用更长一些的色谱柱,也会增加分离度。
4、首先根据化合物的类别与分离要求确定合适的柱子和流动相,然后是考虑流动相里是否加入缓冲液,接着是柱温、流速、梯度、检测器参数(这些参数相互掣肘,需要综合考虑),最后在根据实际谱图考虑梯度的优化。
6、调整流动相条件。一般来讲的话,C18增加水的比例延长保留时间后会改善分离度,可以在流动相中加盐,也可能改善,柱温不好说,需要自己试,但是流动相改善是有局限性的,不行的话也只能换柱子了。
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